產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品是一款可直接對全血樣本進(jìn)行 PCR，無需進(jìn)行 DNA 純化或樣品預(yù)處理的試劑盒?？捎糜谥苯訑U(kuò)增新鮮血液、4℃ 保存血液、冷凍血液、儲存在 Whatman903 和 FTA 商用卡上的干血漬，且兼容所有常規(guī)抗凝劑（EDTA、檸檬酸鹽、肝素等）。
本產(chǎn)品采用 SuperNova 高保真酶，對全血樣品中 PCR 抑制劑具有超強(qiáng)抵抗力，可擴(kuò)增全血濃度高達(dá) 20%；對于長達(dá) 10 kb 的基因組片段可良好擴(kuò)增。本產(chǎn)品的擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端，如需要進(jìn)行 TA 克隆，需將擴(kuò)增產(chǎn)物純化后進(jìn)行加 A 反應(yīng)。本產(chǎn)品含有陽性對照的引物預(yù)混液 Positive Control Primer Mix，能夠從哺乳動(dòng)物和大多數(shù)脊椎動(dòng)物的 sox21 基因上游保守序列中擴(kuò)增出長度 237 bp 的片段。
產(chǎn)品組分
| 組分貨號 | 組分名稱 | A161-02 |
|---|---|---|
| ZA161-101 | 2×SuperNova Blood Direct PCR Mix | 1 ml×5 |
| ZA161-102 | Positive Control Primer Mix (10 μM each) | 100 μl |
保存條件
-20℃ 保存，保質(zhì)期 24 個(gè)月，避免反復(fù)凍融。
數(shù)據(jù)展示
1. 適用于不同長度片段擴(kuò)增
以抗凝劑為 EDTA 的人抗凝血為模板，使用 A161 對不同長度 DNA 片段進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。電泳檢測結(jié)果顯示，A161 對不同大小的片段擴(kuò)增能力均較強(qiáng)，可以高效擴(kuò)增長達(dá) 8 kb 的片段。
2. 延伸速度檢測
以濃度為 10% 的人全血為模板，使用 A161 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，延伸時(shí)間分別設(shè)置為 30 s/kb 和 60 s/kb，電泳結(jié)果顯示，延伸時(shí)間為 30 s/kb 即可擴(kuò)增出不同長度的目的條帶，延伸時(shí)間越長，擴(kuò)增產(chǎn)物量越大，當(dāng)擴(kuò)增片段長度 ≥5 kb，建議延伸時(shí)間設(shè)置為 60 s/kb。
3. 超強(qiáng)的抑制劑耐受性
以人的新鮮血液、常規(guī)的抗凝血（EDTA、肝素、枸橘酸鹽）、血卡、小鼠新鮮血液為模板，分別使用 A161、Com V 和 Com T 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。結(jié)果顯示，A161 具有超強(qiáng)的抑制劑耐受性，可對不同類型血液樣本進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，且擴(kuò)增性能優(yōu)于 Com V 和 Com T。
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